轉譯後修飾分析 | 以 MALDI-TOF MS 進行磷酸化分析 (3)

轉譯後修飾分析

以 MALDI-TOF MS 進行磷酸化分析 (3)

■ 使用 TiO2 富集磷酸肽

蛋白質磷酸化是一種轉譯後修飾,對於控制生物功能非常重要。近年來,質譜已應用於磷酸化位點分析,但由於磷酸化比例較低,且離子化效率隨著磷酸化而顯著降低,通常難以使用原態的混合物進行分析。
以下說明使用 TiO2 將磷酸肽富集,並以 MALDI-MS/MS (無接縫 PSD) 進行磷酸化分析。
圖 1 顯示 TiO2 的富集效應。對磷酸肽進行特異性富集後,觀察到磷酸肽 (m/z 1660),若僅使用脫鹽處理則不可能測出。

圖 1. 使用 TiO2 進行磷酸肽的富集:(A) 以 C18 Tip 脫鹽;(B) 以 TiO2 富集

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