使用 LC-MS 分析人類血漿中的 Favipiravir

Favipiravir (商品名：Avigan^®) 是一種 RNA 聚合酶抑制劑，由 FUJIFILM Toyama Chemical Co., Ltd 開發，用於治療流感。本文說明以 LC/MS/MS 系統對添加入血漿的 favipiravir 進行分析，研究結果顯示此方法具有絕佳的選擇性 (圖 1)。

Favipiravir (PN: C8720^*1) 為目標化合物，而 [¹³C,¹⁵N]- favipiravir (PN: C8853^*1) 為其穩定同位素化合物，購自 Shimadzu 集團旗下的 Alsachim 公司，做為內標準品 (ISTD)。Favipiravir 及 [¹³C,¹⁵N]-favipiravir 的結構式如圖 2 所示。市售人類血漿經 EDTA 2K 處理後，添加入 favipiravir 以製作校正曲線。依據表 1 的 LC 和 MS 分析條件及採用表 2 的 MRM 離子對，進行分析。分析管柱採用 Shim-pack Scepter™ C18-120 (50 mm×2.1 mm I.D., 1.9 µm, P/N: 227-31012-03)。

圖 3 顯示 MS 層析圖。依據 favipiravir 血漿濃度 1、2、5、10、20、50、100 µg/mL 各校正點 (每一校正點 n=5)，繪製校正曲線。 [¹³C,¹⁵N]- favipiravir (20 µg/mL) 溶液使用乙腈製備，做為內標準品。

前處理流程如圖 4 所示。樣品製備步驟如下：將 20 uL 75% 異丙醇 (IPA)、50 µL 血漿、10 µL 的 ISTD 和 200 µL 乙腈 (ACN) 混合並充分振盪，然後離心。將得到的上清液轉移至 LC 樣品瓶，進行分析。