使用 LC/MS/MS 定量分析大鼠血漿中的催產素

催產素是一種胜肽類賀爾蒙,帶有九個胺基酸及一個雙硫鍵,由腦下垂體後葉分泌。由於催產素會促進子宮肌肉收縮,可用於誘發分娩疼痛。近年來,催產素引起較多關注,認為可能與人際關係高度相關,尤其可能影響母子、家人、伴侶之間的互動。本文舉例說明使用 LCMS™-8050 三重四極桿質譜儀分析大鼠血漿中的催產素。

樣品及前處理

Fig. 1 Pretreatment Workflow of Rat Plasma Sample

圖 1. 大鼠血漿樣品前處理流程

大鼠血液 (來自大鼠 SLC Wistar) 經肝素處理以抑制凝血,之後進行離心,收集血漿樣品。在 100 μL 血漿中加入 10 倍體積 (1 mL) 乙腈 (acetonitrile),進行去蛋白質處理。再次離心後,將 1 mL 上清液轉移至另一試管,在減壓條件下離心濃縮。圖 1 為大鼠血漿樣品的前處理流程。

分析標準物質

將催產素標準物質以 30% 甲醇 (methanol)溶液適當溶解稀釋,依據表 1 的分析條件進行 LC/MS/MS 量測。圖 2 為催產素典型的 MRM 層析圖 (10 ng/mL)。

Fig. 2 Typical MRM Chromatogram of Oxytocin (10 ng/mL), Table 1 Analysis Conditions

 

校正曲線線性

圖 3 為催產素的校正曲線。在 0.1 至 500 ng/mL 濃度範圍內製作校正曲線,得到符合要求的線性表現,貢獻率 r2=0.999 以上。催產素標準物質溶液的量測結果,如表 2 所示。

Calibration Curve of Oxytocin (0.1 to 500 ng/mL), Table 2 Measurement Results of Oxytocin Standard Substance